Сравнительный анализ эффективности выявления ДНК риккетсий группы клещевых пятнистых лихорадок в разных видах клинического материала и возможность видовой идентификации возбудителя методом ПЦР

Автор / Мед учреждения

Л.С.Карань / Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва, Российская Федерация

Е.В.Мокрецова / Дальневосточный государственный медицинский университет, Хабаровск, Российская Федерация

Л.Д.Щучинова / Управление Роспотребнадзора по Республике Алтай, Горно-Алтайск, Российская Федерация

С.Ж.Неталиева / Областная клиническая больница инфекционная им. А.М.Ничоги, Астрахань, Российская Федерация

Я.Е.Григорьева / Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва, Российская Федерация

М.В.Федорова / Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва, Российская Федерация

О.Б.Журенкова / Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва, Российская Федерация

Г.С.Томилка / Дальневосточный государственный медицинский университет, Хабаровск, Российская Федерация

Малеев Виктор Васильевич / Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва, Российская Федерация

Цель. Сравнение эффективности выявления ДНК риккетсий при клещевых риккетсиозах группы клещевых пятнистых лихорадок (КПЛ) в разных типах клинического материала: цельной крови, лейкоцитах крови, смывах с первичного аффекта, биоптатах первичного аффекта.

Материалы и методы. В эпидемический сезон 2014 г. на территории Астраханской области, Республики Алтай и Хабаровского края собран следующий клинический материал: 55 образцов цельной крови, 125 образцов лейкоцитарной фракции крови, 11 биоптатов и 36 проб смывов с первичного аффекта. Исследование проводилось методом ПЦР с использованием праймеров и зондов как специфичных для всех риккетсий группы КПЛ, так и видоспецифичных олигонуклеотидов, предназначенных для типирования 8 видов риккетсий: R. aeschlimannii, R. conorii, R. heilongjiangensis, R. helvetica, R. raoultii, R. sibirica, R. slovaca, Candidatus rickettsia tarasevichiae.

Результаты. В клиническом материале от больных были обнаружены риккетсии только трех видов: R. conorii – в Астраханской области, R. heilongjiangensis и R. sibirica – в Республике Алтай и R. heilongjiangensis – в Хабаровском крае. Диагностическая чувствительность при исследовании цельной крови составила 22%; лейкоцитарной фракции крови – 73,3 ± 1,8%, смывов с первичного аффекта – 67% (для R. heilongjiangensis) и 100% (для R. sibirica); биоптатов первичных аффектов – 100%. Специфичность использованных в работе праймеров и зондов подтверждена при секвенировании изолированной ДНК риккетсий по участкам OmpA и OmpB генов для 16 образцов.

Заключение. Метод ПЦР может быть использован для лабораторного подтверждения клещевого риккетсиоза. С большей эффективностью ДНК риккетсий выявляются в биоптатах и смывах с первичного аффекта, при отсутствии этого симптома материалом для исследования является лейкоцитарная фракция крови, взятой в первые дни появления сыпи, но строго до начала антибиотикотерапии.

Ключевые слова: диагностическая чувствительность ПЦР-метода, первичный аффект, риккетсии группы клещевых пятнистых лихорадок.